問:用HPLC進(jin)行分(fen)析時保留時間有時發生漂移(yi),有時發生快(kuai)速變化,原因何在?如何解決(jue)?
( 答:關于漂移問(wen)題:
1、溫度控制不好,解(jie)決方法是采用恒溫裝(zhuang)置,保(bao)持柱溫恒定(ding)
2、流(liu)動相發生變化,解決辦法(fa)是防止(zhi)流(liu)動相發生蒸發、反(fan)應等
3、柱(zhu)子未(wei)平(ping)衡好,需(xu)對柱(zhu)子進(jin)行更長(chang)時間的(de)平(ping)衡
關于快速變化問(wen)題(ti)
1、流速發生變化,解決(jue)辦法是重新設定(ding)流速,使之保(bao)持(chi)穩定(ding)
2、泵中有(you)氣泡,可通(tong)過排氣等操作將氣泡趕出。
3、流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang)不合適(shi),解(jie)決辦法(fa)為改換流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang)或使流(liu)(liu)動相(xiang)(xiang)在控制室內進行(xing)適(shi)當混(hun)合
問:色(se)質聯用中毛細(xi)柱的選擇(ze)應注意什么(me)問題?
答:1、柱效(xiao)要高
2、熱穩定性好
化學惰性強
具(ju)體選擇應注意
1、柱極性。根據分(fen)析樣品選擇不同極性的柱子進行分(fen)析
2、柱子(zi)內徑(jing)(jing)。內徑(jing)(jing)大小(xiao)決定(ding)柱容(rong)量(liang)
3、液膜(mo)(mo)厚度。分析(xi)樣品溫度一(yi)不(bu)一(yi)樣,對(dui)膜(mo)(mo)厚有不(bu)同要求,溫度高液膜(mo)(mo)要厚,溫度低液膜(mo)(mo)要薄
4、柱長(chang)度(du)。柱越(yue)長(chang),柱效(xiao)越(yue)高,分離效(xiao)果越(yue)好,但也(ye)存在吸附(fu)問(wen)題,柱子過長(chang),分析時間長(chang),因此要(yao)根據樣品考慮(lv)柱子長(chang)度(du)
5、外涂層(柱體)的選擇
6、另外還有(you)儀(yi)器型號、分析(xi)對象等因(yin)素
問:液相色譜中峰出現拖(tuo)尾或出現雙峰的原(yuan)因是(shi)什(shen)么?
答:1、篩(shai)板(ban)(ban)堵塞或(huo)柱(zhu)失效,解(jie)決(jue)辦(ban)法是反向沖洗柱(zhu)子,替換篩(shai)板(ban)(ban)或(huo)更換柱(zhu)子。
2、存在干擾(rao)峰,解決辦法為使用較長的柱子(zi),改換(huan)流(liu)動相或(huo)更換(huan)選擇性(xing)好的柱子(zi)
( 問:從那(nei)些方面可以簡(jian)單判別毛(mao)細(xi)管柱子的熱穩定性好壞?
答:1、分(fen)配(pei)容量(或(huo)容量因子(zi))K,好(hao)的(de)柱子(zi)在(zai)高(gao)溫運行后,分(fen)配(pei)容量K不應有(you)明顯的(de)下降,否則,說(shuo)明柱子(zi)的(de)熱穩定(ding)性不好(hao)。
2、理論塔板數n,熱穩(wen)定性好的柱子經受高溫后,理論塔板數應基(ji)本保持恒定
3、柱(zhu)子(zi)的極性(xing)(xing)。熱穩定性(xing)(xing)好的柱(zhu)子(zi),高(gao)溫(wen)前后極性(xing)(xing)變(bian)化(hua)不(bu)大,具體表現為(wei)保留指(zhi)數I值沒有大的變(bian)化(hua)。
4、噪聲(sheng)。熱穩定性好的柱(zhu)子在高溫(wen)下使用后(hou),噪聲(sheng)不能(neng)增(zeng)加.
5、柱(zhu)子(zi)的去活(huo)層,毛細(xi)管柱(zhu)子(zi)涂(tu)固定液前內部(bu)一般要用去活(huo)性試劑(ji)去活(huo)以增加惰(duo)性。質量好的毛細(xi)管柱(zhu)子(zi)高溫后,去活(huo)層
不(bu)應該變化,表現在對強極性樣品或酸(suan)堿(jian)性樣品的(de)吸附(fu)性不(bu)能增加。